遗传学检查方法范文

摘要：人类基因组计划(HGP)经过10年的实施，已取得巨大成果。该计划将显著改变医疗科学，同时也潜伏着新的危险。随着HGP的发展，人类社会在基因检查、药物基因组研究及基因治疗等三大应用领域有着美好的发展前景，同时也面临着新的困境。在将HGP成果应用于人类社会时，我们必须及时考虑和解决所涉及的伦理、道德和社会等问题，从而使HGP成果更好地为人类社会服务。

WhyMapaHuman

——ImpactofHumanGenomeProjectonHumanSociety&10thAnniversaryCelebrationofHGP

Abstract：TheHumanGenomeProject(HGP)hasmadegreatprogressintenyears.HGPisproducingainformationthatwillilluminatesecretoflife.Theeffortcouldrevolutionizemedicalscience.Butnewdangersarearriving，too.Confrontedwiththedilemmasposedbynewtechnologyrelatedtogenetests，pharmacogenomicsandgenetherapy，humanneedtomakeeffortstostudyandresolveethical，legalandsocialquandaries.HGPwilldemandmoreguidancewhentechnicalgainsareappliedintohumansociety.

KeyWords：HGP;genetest;pharmacogenomics;genetheraphy

人类基因组计划(HumanGenomeProject，HGP)自1990年正式启动，至今已走过了10个春秋。这项跨世纪工程刚刚走过了它的第一个里程碑：第22号人类染色体被全部破译!1999年12月2日出版的《Nature》杂志上发表了该染色体的完整基因序列［1］。这是迄今为止被完全破译的第一条人类染色体。虽然其基因图谱中含有一些小的空白点，但它仍然是一项了不起的成就。这项成果的取得足以使科学家们保持兴奋的目光看到完整的人类基因组序列将在今年初步确定，这个完整的基因图谱将含有关于人体每个基因及这些基因的蛋白产物的全部信息。届时，《Nature》杂志若要发表完整基因图谱，大约需要59万页的篇幅。今天，HGP已提供了数万个基因供研究。任何对目前基因数据进行认真思考的人，都会感到束手无策；即便是遗传学家，面对包容在DNA中浩如烟海的遗传信息甚至也会觉得无所适从。

基于同样的原因，即使是在HGP取得巨大成果的今天，仍然不妨碍我们发出基因作图为哪般的疑问和感慨。的确，究竟为什么要对人类作图?将大量的资源用于得到一本浩瀚的90%以上为意义不明确的非编码序列的“天书”是否值得?对于人类社会而言，科学家说基因图谱将能告诉每个人，你从哪里来?你为什么是你?而与人们的利害直接相关的是，我们到底在寻找什么?这种寻找对于我们的生活意义何在?

很显然，就DNA序列信息本身讲，它几乎不能给我们提供特定基因功能的确定信息，更不能回答上述问题。早期的人类基因组计划倡导者把该计划描绘为医学万能药。这种夸张对吸引人们的注意力以及获得项目资助是重要的［2］。但是现在我们必须面对现实。基因包含的巨大信息确实有改革医学的潜力，但获得基因信息的同时也就打开了包含各种伦理问题在内的潘多拉魔盒，这意味着遗传信息的实现从来都不是一帆风顺的。我们需要培养新一代的科学家，用完全不同的角度去充分开发已得到的信息资源，从而阐释生命的奥秘。

1人类基因检查的困惑

当越来越多的人类遗传基因被阐明了的时候，想要知道它对人意味着什么的压力也增加了。直接的问题是，这个婴儿患有遗传性疾病吗?那位少年带有致病基因吗?一个成年人带有与糖尿病或者其它疾病有关的DNA吗?10年前，HGP的始动因素就是要解决包括肿瘤在内的人类疾病的分子遗传学问题。6000多种单基因遗传病和多种大面积危害人群健康的多基因疾病的致病基因和相关基因，代表了所有人类基因中结构和功能完整性至关重要的那一部分。因此，疾病基因的克隆在HGP各种竞争中居于核心的位置，也是HGP启动10年来在社会上显示度最大的成就［3］。而人们更关心的是医生该怎样才能从他的DNA中检查出其罹患癌症、心脏病及老年痴呆症的可能性，以便消除它们的致命影响?

基因检查正尝试对更多的这样的问题提供答案。毫无疑问，基因检查将是与人类社会密切相关的医疗诊断中获得最为迅速发展的重要领域之一。事实上，目前全世界每年都有数十万胎儿接受像羊水检查和绒毛膜抽样检查这样一类的技术检查。人工流产已经作为一种事实的方法来避免出生有可能带有遗传疾病的婴儿。同时这类检查并非只适用于未出生的胎儿，因为其中有许多方法也可以用来比较正确地检查儿童和成人疾病。显然，在今后数年里，随着人类23对染色体的完全解密，基因检查的次数将成倍地增长。

同样正确的是，科学家对人类染色体了解得越多，他们越加意识到疾病的遗传学比预期的要复杂得多，即使是那些所谓一目了然的疾病(单基因病)其易变性也超过了人们的想象。人类所有疾病中只有少数是由于单基因的缺损引起的。大多数比较复杂的疾病涉及许多只对人的易感性起推动作用的基因。这些疾病是由非单一基因的功能缺陷引起的。在任何相关基因上的DNA变异都可能导致一种疾病的表现型。一些基因的变异甚至只是对另一个基因的致病等位基因的补偿。更为重要的是：疾病的发生常常是基因的多种功能和这些功能的相互作用造成的；而人类生活的极其多样的环境，如我们吃的食物、呼吸的空气，我们接触的化学物质以及我们得到的医疗照顾等也同样影响基因的表达。

因此，在医学遗传学家尝试运用基因检查来预测病人的健康状况的努力中，一个不可忽视的现象是，在某些情况下，这些预测是极为准确的；但另一些情况下，测出的DNA变异与疾病的可能性之间并无密切联系。那么，我们应该如何正确对待基因检查所取得的信息?我们既可以利用这些信息来评估疾病发生的可能性，从而通过积极的饮食或行为改变来减少对某些普遍而复杂的疾病(如癌症、高血压)有遗传倾向的人们的患病危险。另一方面，这些信息也将可能导致人们的医疗保险增加，就业困难、爱情婚姻家庭发生问题等。作为遗传学研究的结果影响社会、经济生活的典型事例，目前在一些国家，如英国、美国已通过立法规定，个人的DNA检查数据不能作为保险和就业的依据［2］。

虽然基因检查的迅速发展已经提出了许多不容易解决的伦理上、法律上、社会学上以及科学上的许多难题，但就像其它数百万健康的儿童和成人所证明的，基因检查能够无法估量地改善个人、乃至整个家庭的生命质量。对基因检查将能带来的好处无动于衷是一种不道德的怯懦的行为，但是为了明智地使用这种技术，需要制定深谋远虑的社会和法律的政策。对遗传变异的关注及其它人类基因组序列的应用，我们必须提前预测、考虑和解决此类伦理学、法律和社会问题。

2药物基因组学的承诺

DNA信息除了给疾病诊断带来的改善外，另一个很可能从HGP中较早获益的是改进在现有疾病治疗方法中进行药物选择的方法。尽管都知道个体对药物的代谢存在差异，现代医学实践采取的仍是以某一标准体重作为给药剂量的依据。而且许多疾病不仅是通过治疗进行诊断，更为不幸的是，往往在找到正确的药物之前，你可能已经花了4～6个星期去试验了其他4种不同的药，忍受了难耐的治疗过程和药物副作用。

不久的将来，理想的场景是当你在医院看病时，在医生给你开出处方前要做一件事，即从你头上拔下一根头发，做个DNA检测来看看什么药对你最恰当，从而不久你就能用上适合其本人基因组成的药品。这就是HGP的分支之一——药物基因组学的承诺［4］。这门新兴的科学，旨在从基因水平准确地阐述某些药物为什么有些人可获得理想效果，而另一些人则否。

人体疾病都是起因于细胞内正常代谢途径发生改变，代谢途径是有基因决定的。因此，不论是器质性病变还是功能性疾病无不与基因密切相关。从这个意义上说，药物设计应该建立在基因组信息的基础之上。科学家希望运用基因组信息来指导设计针对个人的药物预防计划并研制切合特殊患者基因构造的药品，从而避免毒害副作用产生。此外，DNA信息将帮助科学家们改变传统的从动物到临床的药物试验模式，从而可以大大减少药物试验的花费。由于临床用药的疗效与个体的遗传因素相关，对于在特定人群中具有卓越疗效的药物，涉及药物反应的用以鉴定基因差别的DNA序列分析，将有助于确定药物对小部分人群是否好。在这种情况下，药物使用前先进行DNA诊断将是可行的。诱人的一点是，由于改进的临床实验，将使更多、更有效、更便宜的药物出现［2］。美国人类基因组研究所所长FrancisS.Colin预言道：药物基因组学将是下一代医学革命的一部分；用药个体化是其中的一项目标；很快，医生们将常规给病人做基因检测，以确保开给病人的药品实际上对该病人是最恰当的［5］。相对于基因治疗，药物基因组学的承诺可能更为实际或将实现的更早一些。

3基因治疗的前景

HGP之所以展开，是因为它似乎能够带来最大的希望，使人类最终不仅能治愈长期已知的遗传性疾病，而且能够治愈与基因有着更为神秘联系的其他疾病(包括癌症)。或许以后人类再不必担忧罹患癌症、AIDS和心脏病之类的致命疾病，因为它们都可以轻而易举地扎上几针就可以预防和终身受益了。基因治疗的最终目的就是实现这些带有科学与科幻色彩的奇迹，从而被喻为医学史上的第四次革命。近年来，基因疗法涉足范围已超出遗传性失常疾病并进入后天获得性疾病中。实际上如今80%的临床测试都集中在癌症和AIDS上，致使基因疗法应用潜力远远超过相对较少的遗传性疾病［6］。随着HGP继续查明更多基因及其功能，基因疗法涉足疾病的种类将不断增加。

当前的问题是：人类将面临体细胞基因治疗和胚系细胞基因治疗的选择［2］。体细胞基因治疗将基因像药物一样的使用，其目的是将基因定向导入致病细胞以便替代或代偿这种致病缺陷。初步临床研究表明这种治疗方法是有前途的。这种基因治疗效用的发挥、副作用以及花费的多少，是决定是否使用基因或基因产物的主要因素，这不牵涉道德和法律问题。现代医学遗传学的倾向是人们已不满足只在体细胞上对致病基因的修修补补，科学家认为在生殖细胞水平采用胚系遗传工程(germ-lineenginerring)进行基因治疗，将诞生完美无缺的人类［7］。与体细胞基因治疗情况完全不同，胚系细胞基因治疗的目的是以遗传的形式改变个体的全身的每个细胞。这种对生殖细胞的遗传修饰将会改变受术者及其子孙后代的DNA。在技术上，我们已经能够拥有转基因动物，至于转基因植物或食品早已成为我们生活的一部分。而胚系遗传工程产生的转基因人，在不久的将来或许比所谓的克隆人更易实现，也是更具意义的实践。因此许多科学家对应用于人类的胚系细胞基因治疗跃跃欲试。然而在转基因小鼠中，我们能够随意增加或者破坏几乎任何一个基因，而且可以不考虑使用限制。相反，尝试在人类应用则应该慎重。鉴于生殖细胞疗法会永远改变人的基因库，它是否应该受到鼓励或宽恕必须取决于生命的质量和道德因素［2］。

讨论基因疗法的前景和问题，如果不涉及伦理上的影响，那是不完整的。尤其是当我们开始改变生殖细胞时，这个状况将会变得更危险。遗传成分方面的错误可能给后代带来许多问题。不久，人类或许将面临更困难的决定，我们已经具有了改变我们人类基因结构的能力，我们将能设计我们的子孙后代。另一方面，遗传学知识告诉我们，遗传变异对物种是一种有意义的资源。在物种水平上的进化发生是保证适者生存。随着我们对基因调节人体功能的机制的了解更加深刻而广泛，我们人类该根据怎样的标准去选择有利于我们自己的性状，而对于诸如身材矮小、白化病、耳聋、活动过度和好攻击等所谓不利的性状是一律剔除(Knock-out)呢，还是容许这种个体差异的多样性存在?然而，谁会拒绝提高智力的遗传工程的诱惑呢?人类已成为地球上的主宰物种。我们已经控制了我们未来发展的大多数方面，现在我们正渴望通过遗传控制去掌握自己的进化，或许，自然界的下一步进化是在一个物种最终获得了这种能力的时候。美国加州大学生物物理学和社会学家斯托克对此评价道：“进化正被技术所替代，人类正变向有意识的设计对象。”［8］福兮?祸兮?这是一个问题。

我们的社会已跨入盲目发展核能的时代，但我们不能盲目地跨入遗传工程的时代。正如我们在基因疗法方面所得到好处那样，我们必须记住基因疗法带来的危险并保持警惕。这种把医疗技术的焦点缩到分子水平的理论和方法正在不断地给医学革命注入动力，也正是这种理论和方法使我们不得不面临最为严峻的伦理学难题。我们必须确定，我们要在何种程度上设计我们的子孙后代。我们是否有权利未经过后代的允许(实际上也不可能得到这种允许)就改变他们的基因?在设法解决这一问题的过程中，我们将面临人类的可塑性与可完善性等问题。

4展望：迎接后基因组时代的到来

DNA双螺旋理论第一次让人类意识到，千姿百态的生命原来是由这么两条歪歪扭扭的东西所决定的。生命是如此简单以至于我们错误地认为只要将这两条螺旋搞清楚，就可以掌握人类自身的一切。很幸运的是大多数科学家对此已开始有了清醒的认识。HGP的完成离解开生命的奥秘仍然有漫长的路要走，这条道路的名称是后基因组时代。不论这条道路有多漫长，一件事已经达成共识，随着人类基因组计划的即将完成，真正有意义的探索将不来自序列而是来自对基因怎样被调控的解答。

无论如何，要HGP对诸如胚系基因治疗等伦理道德困境负责是不公平的。这些问题在计划实施前就已初现端倪，甚至从遗传学应用于人类时就意味着潘多拉魔盒的降临。HGP不是引起了新的问题，只是扩大了它的范围。HGP的发展已经超出了人们的预料，它使生命科学面目一新。其成果已反映在医疗临床和制药产业上。对人的生命观、人生观也会带来巨大冲击。因此如何克服其消极影响、最大限度地发挥其积极作用，使其为人类造福是已经摆在人们的面前的任务。而HGP对人类社会的终极影响/意义或许要很多年后才清晰可见。

参考文献

［1］DUNHAMI，SHIMIZUN，ROEBA，etal.TheDNAsequenceofhumanchromosome22［J］.Nature，1999，402:6761，489-495.

［2］CHARLESRCANTOR.HowwilltheHumanGenomeProjectimproveourqualityoflife［J］.NatureBiotechnology，1998，16:212-213.

［3］陈竺，李伟，俞曼，等.人类基因组计划的机遇和挑战.Ⅰ.从结构基因组学到功能基因组学［J］.生命的化学，1998，18(5)：5-17.

［4］PERSIDISA.Pharmacogenomicsanddiagnostics［J］.NatureBio-

technology，1998，16:791.

［5］ADAMGIR，SANDERSR，JONSSONJ.Thedevelopmentofpharmacogenomicmodelstopredictdrugresponse［M］.PharmainformaticsSupplement，1999.30-33.

［6］张腾飞，钱关祥，陈诗书.人类基因治疗研究的现状［J］.生命的化学，1999，19(1)：11-12.

遗传学检查方法范文

关键词：湖南汉族人群；冠心病；血瘀证；遗传易患性；血管紧张素转换酶基因；多态性

中图分类号：R541.4R256.2文献标识码：A文章编号：1672－1349(2007)09－0787－03

冠心病(CHD)是一种多因素疾病，受环境和遗传等多因素的影响，为有明显遗传倾向的多基因病。CHD的发生与发展与多种易患基因多态性有关，尤其与血管紧张素转换酶(ACE)插入/缺失(I/D)基因多态性等密切相关。中医理论认为冠心病基本病机为心脉瘀阻，血瘀证是CHD最常见的证型，那么ACE基因多态性是否为CHD血瘀证家系的遗传分子生物学标志之一，值得深入研究。本研究就是在前期对ACE基因多态与冠心病基因存在群体关联的研究基础，利用核心家系资料进行单体型相对风险分析(HHRR)和连锁不平衡检验(TDT)分析，检验该基因座是否与中国湖南汉族人群冠心病血瘀证基因存在连锁。

1资料与方法

1．1研究对象2003年10月－2005年11月对长沙地区冠心病中医证候临床流行病学研究中符合WHO冠心病诊断标准的3116例冠心病病人，筛查冠心病家族史，对其中521例存活且愿意接受调查者进一步开展遗传流行病学调查。冠心病血瘀证家系定义为．先证者为CHD血瘀证病人，其一级亲属(父母、同胞及子代)至少有1人为冠心病血瘀证病人。共收集先证者一级亲属中至少有1例冠心病血瘀证病人的家系40个和健康人家系10个，属cHD血瘀证家系组25个家系81例，其中核心家系18个共60例。属非CHD血瘀证家系组15个家系共50例，其中核心家系10个共32例。两组核心家系共28个。

以符合1979年WHO制定的缺血性心脏病心绞痛、心肌梗死的诊断标准，以病人临床症状、体征和病史，结合心电图改变进行诊断。参照WHO多国心血管趋势和决定因素监测(MONIA)研究方案设计冠心病调查表，详细记录每一病例的临床表现、辅助检查、生化结果及危险因素。

1．2实验方法采血前禁食12h，于08:00空腹静脉取血2mL，以2％EDTANa抗凝。参照《分子克隆实验指南》进行基因组DNA提取，PCR－RELP方法鉴定DNA基因型。引物：由上海生工合成。

1．3统计学处理应用SPSS13.0软件包进行统计学处理，基因型、基因分布频率比较采用X2检验，在核心家系中有关等位基因与疾病的遗传关联分析采用单体型相对风险及传递不平衡检验分析数据，用X2检验各率的分布差异。

1．3．1HHRR统计核心家系中父母及子(女)的等位基因频率获得四格表，X2=2N(WZ-Xy)2/(W+X)(W+y)(X+Z)(y+Z)查表得出P，检验有统计学意义则有关联，反之则无。

1．3．2传递不平衡检验(TDT)TDT＝(b-c)2/(b+c)；此统计量近似符合自由度为1的X2分布。以b表示含有关联等位的杂合子型亲代传递该等位的例数，以c表示杂合子亲代未传递该关联等位的例数，用配对四格表McNemar检验作出独立性判断。

2结果

经ACE基因多态性分析表明，从28个核心家系中的CHD病人及双亲中共检出2种等位基因，分别计算病例组和父母组的基因型和等位基因的数目和频率分布。

2．1ACE基因型在核心家系中分布的Hardy－Wemberg平衡检验无论是病人还是双亲的ACE基因型分布频率观测值与预计值差异都不显著(双亲X＜sup>2＜/sup>=0.0896，病人X＜sup>2＜/sup>=0.3172，P＞0.20)，均符合Hardy－Welnberg平衡。说明样本来自一个较大的、处于随机婚配平衡状态的群体，具有一定代表性。

2．2单体型相对风险分析对28个核心家系的资料采用基于单体型HHRR方法，计算出冠心病与ACE等位基因关联性，其中在血瘀证家系中的ACE(2N)个等位基因中，16(w)个D基因发生传递，12(Y)个未传递；44个I基因中20(X)个发生传递,24(z)个未发生传递。经X＜sup>2＜/sup>检验，提示冠心病血瘀证与ACE的D基因多态性无关联(P＞0.05)。

2．3传递不平衡检验分析TDT法在于检验零假设(Q=1/2)，若拒绝该假设可认为两位点连锁。本组资料中符合TDT分析的血瘀证家系15个，等位基因D从杂合子父母向子代传递了10次，未传递5次，等位基因从杂合子父母向子代传递了5次，未传递10次。按X＜sup>2＜/sup>=(b-c)＜sup>2＜/sup>/(b+c)=1(P＞0.05)；结果提示，冠心病血瘀证易患位点可能与ACE的D等位基因位点不连锁(P＞0.05)。

3讨论

冠心病是威胁人类健康的重要疾病。流行病学调查、疾病监测和死因统计结果显示，冠心病发病和死亡在世界范围内仍呈上升趋势。目前从微观水平探讨冠心病发病的遗传易患机制是进行其病因研究的主要手段之一。而冠心病是一种复杂性的多基因疾病，更倾向于应用遗传易患性和危险因素的概念。目前据流行病学调查、双胞胎研究以及家系调查结果均表明冠心病有明显的家族倾向。据遗传流行病学研究显示，冠心病一级亲属的发病危险较非冠心病者增加了2倍～10倍，冠心病存在家族聚集性，且亲属CHD发生越早，该个体罹患冠心病的危险越高。

以往通过对54例冠心病血瘀证先证者和54例健康人进行家系遗传分析，提示子女患冠心病血瘀证与亲代双方患病有因果关系。冠心病血瘀证可能是一种具有遗传倾向的“多基因证”。

遗传学检查方法范文篇3

实际上，产前检查不等于产前诊断。产前检查是围产保健的重要措施之一，通常是从怀孕中期开始定期对孕妇和胎儿进行健康检查和孕期保健指导，包括定期测量孕妇的体重、宫底高度、腹围以及血压，检查孕妇的血、尿，了解胎儿的生长发育情况，以及胎儿是否存在宫内缺氧或发育迟缓等异常。当然，在常规产前检查中，医生也会对胎儿做一些B超检查，以了解胎儿的生长发育情况以及是否存在组织结构的畸形。从普遍意义上说，常规的产前检查，目的在于保障怀孕母亲和胎儿的健康，预防和治疗妊娠期间母子可能发生的各种异常。

而产前诊断是近年来发展起来的一门新兴的边缘医学科学，又称出生前诊断或宫内诊断。它是在胎儿出生前应用各种方法了解胎儿的外表结构、对胎儿的染色体进行核型分析、检测胎儿细胞的生化成分或对其进行基因分析，从而对某些胎儿先天性畸形或遗传性疾病及时作出诊断，以防止患有严重遗传病、智力障碍以及先天畸形胎儿的出生。因此可以说产前诊断是优生学科，是产前检查的延伸。产前诊断的目的主要有三个:①诊断胎儿先天畸形或遗传性疾病;②了解胎儿在宫内的生长发育和成熟度;③诊断非遗传性疾病和胎儿宫内窘迫，然后根据诊断结果进行选择性流产或宫内治疗。产前诊断目前已成为世界各国应用最广泛、实用价值最为显著的预防性优生措施。

据统计，我国的新生儿中，肉眼可见的先天性缺陷患儿约占1.3%，先天性疾病已成为婴儿死亡的主要原因。目前，已发现有5000多种可遗传的先天性疾病，它们给社会和患儿家庭带来沉重负担，也给患儿造成很大的伤害，人们希望尽快找到一些早期诊断这些先天性疾病的方法，产前诊断就是顺应这一要求而发展起来的。

产前诊断可以通过超声波、X线、磁共振、胎儿镜等检查，观察胎儿有无先天畸形;可以对绒毛细胞、羊水细胞、胎儿血液等进行分析，以诊断胎儿有无染色体疾病、先天性代谢性疾病、血红蛋白分子病、神经管缺陷等疾病;可以通过基因分析，判断胎儿有无血友病、假肥大性进行性肌营养不良、珠蛋白生成障碍性贫血等遗传病;还可以通过测定孕妇血清，预测胎儿是否发生先天畸形。当前，产前诊断技术正在向无创伤性产前诊断技术方向发展。经过科学家几十年的努力，现已确定孕妇外周血中存在胎儿细胞，提示可利用孕妇外周血提取胎儿细胞进行产前遗传性疾病的诊断。

那么，哪些孕妇必须做产前诊断呢？目前主张，下列孕妇应加强产前遗传咨询和必要的产前诊断，以及时发现和防止先天缺陷胎儿的出生。

1．高龄（年龄≥35岁）:35岁以上的孕妇所生胎儿染色体异常的机会比正常人多许多倍，如25～35岁孕妇生育先天愚型的概率为0.15%，而35岁以上的孕妇为1%～2%，40岁以上则可高达3%～4%，其他一些胎儿染色体异常也与孕妇年龄因素有关。

2．有不良生育史，如生育过先天性畸形、无脑儿、唐氏综合征以及其他染色体异常患儿等。

3．有反复流产、不孕、不能解释的围产期死亡（主要是多发性先天畸形）史。

4．夫妇一方有染色体平衡易位。

5．有家族性遗传疾病史或夫妇一方患有遗传疾病。

6．孕早期病毒感染。

7．孕期使用过致畸药物，如抗肿瘤药物、孕激素等。

8．孕早期与大剂量放射线、有害物质接触过。