出差管理细则(收集5篇)
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出差管理细则篇1
1.1细化工作计划,做到事事有安排
将全年目标任务细化落实到具体的科室、人员,制定监测工作细化安排表和工作进展情况示意图,明确工作任务、时限、进度和质量要求。各项工作做到月初有计划、过程有监督、月末有总结。有条件的话,可以引进实验室信息管理系统(LIMS)实时监控各项监测任务的落实、完成情况。
1.2细化工作流程,做到事事有人管
为适应新形势下环境监测任务的要求,实现监测工作提速提效、服务创质创优,科学编制各项工作流程,对每项业务运转环节细化时间安排、质量标准和工作衔接。将监测工作程序梳理成流程图,有针对性地实施流程再造,把工作量化细化到每一个具体环节,缩短工作时限,提高工作效率。加强工作环节协作,在工作流程的每一个环节做到信息共享、加强协作、密切配合,实现工作环节的有机衔接,杜绝推诿扯皮、工作脱节断档现象出现。对每项工作、每个任务要精确到人,具体工作也要安排到位,做到360度无死角、无盲点,做到事事有人管。
1.3细化监测规范、制度,做到事事有标准
监测规范、管理制度要求环境监测站职工一定要按照规则和准则办事。一个单位如果没有制定规范性的管理制度,那单位将很难正常运行。所以,制定有效规范的管理制度和工作标准是保证监测站规范化和精细化运作的前提,把规章制度作为评判是否符合制度和标准的要求。目前几乎所有的环境监测站均编制了《质量手册》、《程序性文件》,把它们作为环境监测机构正常运行的纲领性文件。使得环境监测机构进入了规范化管理的新时期,对于提升环境监测机构管理水平和能力起到了不可忽视的作用,伴随着社会的进步,其局限性也逐渐呈现出来。首先,由于编制过程中重点关注了标准的要求,比较少地考虑到结合机构的运行状况和作业习惯进行的编制。大多数情况下,都会把满足标准要求作为评判的依据。其次,编写人员在认知上会存在一定的差异,而造成对于过程中要求的误解,对于过程中关注的侧重点也会存在不同。所以,文件的要求或规定肯定会存在很大的差异,体系管理中经常出现的“两张皮”现象就是由此产生的。因此实施环境监测站精细化管理必须进一步明确环境监测站工作职责,明确体系对监测站工作要求,使规范化管理和精细化管理实现“无缝对接”,在“无缝对接”的基础上梳理日常工作、细化程序文件,增强程序文件的可操作性。实际工作中严格按照国家制定的规范、标准及《质量手册》、《程序性文件》、《作业指导书》要求科学布点、监测,推进采集样品、分析化验、数据处理等环节逐步向精细化管理转变,这样才能确保监测数据的科学性、规范性和公信力,努力实现环境监测工作中的“三个说得清”。
1.4加强执行,做到事事有考核
精细化管理的过程中,考核是必须的,并且从领导到职工,从管理到具体监测项目,都要进行严格的考核,做到严格标准、严格要求、站班子成员和科室负责人要带头执行,起到模范带头作用。制定出台监测站绩效(量化)考核细则,使每一项的监测任务和各项管理量化,努力做到考核结果公平合理、奖勤罚懒、过程真实、结果可靠、被考核者信服。加大对目标任务落实的督办力度,经常性地对主要工作落实情况进行检查,促进各项工作提质、提效、提速。进一步完善绩效考评制度和岗位工作过错追究的制度,进行强化落实,确保各项工作落到实处。
2环境监测精细化管理实施要点
2.“1领导推动”是实现精细化管理的重点
企业领导人员明确的组织职能是开展精细化管理的关键。企业领导人员制定有效的制度和有效的规则是确保企业的正常有序运转的前提,这样才能全面发挥出“人”的作用。另外,发挥企业领导人员职能作用,通过领导人员在企业中树立的权威,对各个部门之间的关系进行适当的调节。同时,调动各个利益群体之间的积极性和创造性,通过这样的方式,来实现企业所指定的目标、计划和设想。
2.2实行精细化管理要重视领导和职工的培训
管理者是决定监测工作能否取得成效的关键,所以在推进精细化管理过程中,管理者一定要明确自己的位置。(1)要转变观念。要采取“走出去”的办法,看看许多先进单位精细化管理所带来的成效,开阔视野、认识不足、找出差距、消除自满情绪和畏难情绪,一定要有精细化管理的信心。(2)要加强学习。采取定期的考试或专项的座谈建议会,督促管理者加强自身的学习和进步。(3)要转变作风。站班子成员和科室负责人要做到深入现场指挥,养成“细心、耐心、细致”和“勤思考、亲自干、敢负责”的习惯。
3结语
出差管理细则篇2
关键词:新税法新准则差异
会计与税法既存在许多共同点。又存在着一些差异。2007年1月1日开始实施的《企业会计准则》与2008年1月1日起实施的《中华人民共和国企业所得税法》、《中华人民共和国企业所得税法实施条例》也是如此。两者从不同的角度(前者从会计角度,后者从税务角度)对企业所得税的操作作了明文规定。由于两者存在许多差异。所以操作难度较大。新税法与新会计准则同时实施,进一步加大了企业会计处理与税法差异的难度。如何理解差异和准则处理差异。是企业非常关注的问题。
一、新会计准则与新税法差异形成的原因
1、主体不同
新所得税法是由国家立法机构制定、税务机关贯彻实施的。而会计制度、准则是由财政部制定的、贯彻实施的。新所得税法规范的是所得税的处理,即我们通常说的税务处理。会计制度、准则规范的是会计处理。
2、目标不同
新会计准则规定。财务会计报告的目标是向财务会计报告使用者提供与企业财务状况、经营成果和现金流量等有关的会计信息。反映企业管理层受托责任履行情况,有助于财务会计报告使用者作出经济决策。而税法则是为了保证国家强制、无偿、固定地取得财政收入,依据公平税负、方便征管的要求,对会计准则的规定有所约束和控制。
3、原则不同
目的不同导致了二者遵循的原则有很大差异。会计核算原则与所得税税前扣除确认原则相比,虽然都规定了配比原则和相关原则。但其所指的内容却不尽相同。
二、新准则与新税法的差异
(一)会计计量属性上的处理差异
会计准则――基本准则第43条规定,企业在会计要素进行计量时,一般应当采用历史成本,采用重置成本、可变现净值、现值、公允价值计量的,应当保证所确定的会计要素金额能够取得并可靠计量,并不限制用其他方法计量。
实施细则第56条规定,企业的各项资产,以历史成本为计税基础。企业持有各项资产期间资产增值或者减值。除国务院财政、税务主管部门规定可以确定损益外,不得调整该资产的计税基础。
(二)确认收入上的处理差异
1、收入确认的条件不同
企业会计准则第14号――收入第四条。销售商品收人同时满足下列条件的,才能予以确认:(1)企业已将商品所有权上的主要风险和报酬转移给购货方。(2)企业既没有保留通常与所有权相联系的继续管理权,也没有对已售出的商品实施控制。(3)相关的经济利益很可能流入企业。(4)收入的金额能够可靠计量。(5)相关的已发生或将发生的成本能够可靠地计量。
实施细则中对销售货物收入的确认条件:(1)企业获得已实现经济利益或潜在的经济利益控制权。(2)与交易相关的经济利益能够流入企业。(3)相关的收入和成本能够地合理计量。
可见,税法对收入的确认不以“风险转移”为必要条件,只要商品所有权发生了变化。就应该确认为收入。
2、收入确认的金额不同
企业会计准则第14号一收入第五条规定:合同或协议价款的收取采用递延方式,实质上具有融资性质的,应当按照应收的合同或协议价款的公允价值确定销售商品收人金额。应收的合同或协议价款与其公允价值之间的差额,应当在合同或协议期间内采用实际利率法进行摊销。计人当期损益。
实施条例对纳税义务人采取赊销或者分期收款方式销售货物的。增值税纳税义务发生时间为合同约定的收款日期的当天,在分期收款方式下,每笔收款分别确定纳税义务发生时间。
(三)费用支出确认上处理差异
1、业务招待费的处理差异
会计准则规定。企业为组织和管理企业生产经营所发生的业务招待费应当直接计入当期损益。
新税法及其实施细则第43条规定。企业发生的与生产经营活动有关的业务招待费支出。按照发生额的60%扣除,但最高不得超过当年销售(营业)收入的5%o。
2、广告费、业务宣传费的处理差异
会计准则规定,企业在销售商品过程中发生的广告费、业务宣传费应当直接计入当期损益。
新税法及其实施细则第44条规定,企业发生的符合条件的广告费和业务宣传费支出。除国务院财政、税务主管部门另有规定外,不超过当年销售(营业)收入15%的部分,准予扣除;超过部分。准予在以后纳税年度结转扣除。
3、工资薪金支出处理差异
会计准则第9号职工薪酬第四条规定,企业应当在职工为其提供服务的会计期间,将应付的职工薪酬确认为负债,除因解除与职工的劳动关系给予的补偿外。应当根据职工提供服务的收益对象,计人有关资产成本或相关损益。
出差管理细则篇3
关键词:独立学院差旅费弊端精细化管理
独立学院是依托母体学校优质资源创办起来,走自己独特发展之路同时,部分制度则完全是遵照母体高校制度执行,差旅费管理制度就是其中的一项。差旅费是独立学院日常公用经费支出中重要内容,随着独立学院规模壮大,差旅费开支随之成倍增加。目前独立学院差旅报销中存在诸多问题,出差人员经常抱怨出差不划算,并对财务严格报销有不满情绪。究其原因是出差人员的伙食补贴、公杂补贴不足冲抵实现开支,出公差要倒贴钱。独立学院要充分意识到目前执行的差旅制度已不适应当前经济发展需要,及时修订一套科学合理的差旅费管理制度,能为职工差旅工作提供恰当支持,保证出差人员工作与生活基本需要,贯彻勤俭节约精神,合理降低成本,有效实现差旅费用精细化管理,同时对于加强独立学院创造性开展日常财务管理工作也具有重要意义。
1.当前独立学院在差旅费管理执行中普遍存在的主要问题
独立学院缺乏完善的差旅管理意识,差旅费用控制薄弱,制度制定与执行呈现严定宽报态势,从执行情况来看普遍存在如下问题:①近几年各地相继开出动车、高铁,这些车速度快、票价高,按行车速度分一等座二等座(两者价格相差很大),原来差旅费制度对乘坐火车的软硬卧都有严格的区分和限制,即便乘坐严格限制的卧铺,价格也要比现在的动车或高铁的价格低。目前差旅报销无新制度出台,财务人员无据可依,只好实报实销,原来的差旅报销制度已显得苍白无力。②出差期间打乘出租车现象比较严重,金额越来越大,一次出差往往要报销上百元的打乘出租车费,与城市间交通费金额相当,这些打车费用只要分管领导签批就能全额报销;相反选择乘公交,坐地铁等省钱交通工具的按制度是不能报销,而公杂补贴不足以冲销乘车开支,无形中引导大家去打车,造成铺张浪费。③对差旅费中不能报销的部分花销,则以虚开住宿费用、购买办公用品、招待费用、会议费、培训费等名目进行处理。其次举办会议单位常以开会的名义组织旅游,比如开会中就有一项两日游或发放纪念品之类的活动,其费用在会务费中体现,所以现在开会的会务费很高。④住宿费中加开伙食费用,报销中超标部分同样只要分管领导签字就可实报实销。或将出差中花销的出租车费、餐费发票不在差旅费报销中体现,分次单独签单报销。也有的是带车出差,司机与同行人员分别报销,尽可能想得到补贴。⑤现行差旅费报销伙食、公杂补贴标准偏低,以江苏省内出差补助标准来看,伙食补贴省内20元,省外40元,公杂费省内10元,省外20元。现时状况在南京消费一碗面也要十几元,一天下来吃饭最少也要50元左右。⑥制度缺少对外出参赛学生、驾驶员等特殊人员的考虑,带队外出参赛老师报销时很尴尬,司机出车同样很辛苦。⑦制度体现不出节约奖励,超支不补原则。也造成老实人吃亏现象的存在。
2.独立学院如何做到差旅费精细化管理,发挥专项费用管理作用
要做到差旅费用精细化管理,加强制度建设是关键,规范财务管理行为,解决差旅费用透明问题。独立学院应能根据当时经济发展水平,使差旅费以“可控、在控、能控”为管理思想,制订科学合理差旅报销制度。尝试将企业精细化管理理念方法移植到独立学院差旅管理之中。独立学院实施精细化管理具体措施应以构建以人为本的思想为指导,对每一个环节管理做到细化,从多个层次跟踪,多个方面分析,最主要是完善内部的整套流程,其管理好坏在一定程度上体现一所学校的管理水平、管理效率。具体地讲就是将差旅费精细化实施方案细化为严格控制其报销流程,从出差申请、天数控制、乘坐交通工具选择到住宿标准费、伙食、公杂补助标准制订,各项费用超标与否及分项补贴计算,票据的合法合规,签字审核报销等等每一个环节的把关与控制都关系到差旅费开支真实与否。运用科学方法,从精细化角度出发,学会信息收集、整理和积累,把基础性工作做细做实,使独立学院差旅费管理上一新台阶。
3.改进独立学院差旅费管理建议和具体措施
独立学院应能根据目前经济发展实际状况,以《中央国家机关和事业单位差旅费管理办法》为指导,参阅不同省份院校差旅费制订标准,及时修订出符合当前实际消费的报销标准,创造性开展工作。制订政策目标是进行成本管理,笔者认为差旅费改革的指导思路应是宽定严管,制定差旅费报销标准要适当提高,放宽限额,但在审核环节应严格控制,加强制度约束,给审核工作提供尽可能多的客观标准,避免争议,降低随意。真正实现制订政策目标。可以从以下方面加以改进独立学院差旅费管理办法:①重新修订一套体现独立学院文化、充满人性化的差旅政策。管理层应在思想上对差旅费管理予以足够重视,政策规定出差人员按级别选择乘坐交通工具,除了对乘坐飞机有严格限制外,为提高办事效率,可适当放宽乘车标准,地铁、磁悬浮列车票据要准许报销,打车费可给予报销一定标准范围。对带车出差的要细化报销范围,目前带车外出的比较频繁。应考虑驾驶员这一特殊职业,可按公里数给予适当补贴,但对外出期间行车违规被罚的要由个人负担,单位不能给予报销。外出参赛学生也要列入补贴行列,可按外出一般人员补贴。规范报销程序,建立健全出差审批管理制度,学院要设计“出差申请审批表”,出差人员在出差前要填写出差申请审批表,详细写明出差事由、时间、地点,出差人员职务级别人数等内容,由分管领导签字,凭此单据到财务正常办理借款手续,此申请表借款时供财务审查,等出差回来报销时附后。②改革差旅报销办法。具体报销管理将城市间交通费按照出差人员规定等级内凭票据全额报销,其余费用住宿、伙食、公杂可采取在规定的限额内凭票报销,超支自付,节约归己的办法,无住宿发票的不能享受住宿包干补贴。这种报销方法更能有效杜绝一些不合理开支和超支浪费现象,为学院节约不必要的开支,让员工外出办事满意。地区划分以特殊地区和一般地区比较科学,特殊地区指:北京、上海、天津、广州、深圳、珠海、海南。特殊地区以外的都是一般地区。从实际调查情况来看,以一般人员为例一般地区包干标准住宿300元+伙食50元+公杂30元总计可定为380元,特殊地区可为定为480元(住宿380元+伙食60元+公杂40元包干。这里住宿费是指标准间或单间,同性外出,仍按一个标准间包干,只是伙食、公杂按人员补贴。如两位男性出差每天总补贴为300+50*2+30*2=460元;带车出差的省内350元包干,省外440元包干,尽管限额与独立学院目前正在执行的标准相差不多,但报销方式不同,出差人员会积极主动节约费用,不必再为如何找票冲抵伙食费等开销花心思,集中精力办理好出差事务,对增强职工主人翁意识起到很好的效果。也可以选择住宿费按地区及职务级别规定上限标准,在限额内报销,节约部分给予出差者奖励节约金额的50%,伙食补贴、公杂费实行定额包干,提高定额标准,不再报销费用。③严格审核,规范报销程序,加强管理。审核把关不单单是财务部门的事情。从出差开始就要由所在部门和分管领导把好第一关,对客观原因、主观原因做出正确分析,严格控制出差天数和人数,不能报销的不予签字。财务人员应严格按规定办理报销手续,常规差旅报销有会议通知的一定要求附会议通知,根据会议通知决定补贴的标准、项目和天数。一次出差开支的票据应一次报销,不允许将同一次出差票据多次报销,报销过程中最大限度减少特批情形的发生。④个人信用卡(或银行卡)的消费为出行人员带来了便利,提倡刷卡消费,出差期间不必事前预借大量现金。⑤鼓励登陆党政机关出差会议定点饭店查询网,该网站能迅速查询符合条件的饭店信息,并以列表形式出现,用户可以进行比较住在哪家旅店最方便且经济实惠,在互联网上直接预定所要入住的旅店,方便快捷。学院为了更好掌握当前各地住宿价格,可指定专人兼职负责查询信息。特别关注所在学院的省汇城市,从近几年报销差旅情况来看,每年赴省汇城市出差的次数约达到50%至60%,要能充分利用互联网络实现对差旅费进行信息化自动化成本管理。网络给我们提供了解外界信息的平台,预订车票、酒店等都可以查到其最优惠的价格。也可借鉴中小企业使用的网上差旅费管理系统软件,即“中小企业商旅通”,此系统可以帮助企业严格执行差旅政策,能在互联网上可直接与众多差旅服务供应商进行结算,实现费用公开化管理。这一管理方式将为独立学院探索差旅费管理提供了新的思路。
差旅费政策直接关系到员工个人切身利益,需要有清晰的指导依据,要做到精细化管理,尽可能的增强差旅费管理的透明度和合规性,提高费用管理流程效率,增加员工积极性,让员工得到所需。同时也有助于独立学院对资金进行宏观管理,提高资金利用率。差旅政策至少每五年要修订一次,以适应经济的发展。
基金项目:2011年江苏师范大学科文学院项目。
参考文献:
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[4]刘会芬.谈行政事业单位差旅费报销办法J].交通财会,2005年1月.
出差管理细则篇4
Abstract:Supervisionregulationisgenerallyinaccordancewithrulesofprofessionalpreparation,withdifferentprojectsandtechnicalqualitiesofsupervisors,therearegreatdifferenceseveninthesamerulesofprofessionalsupervision,manydetailsarenotspecificandoperational,whichcannotbeaneffectiveguidanceworkfile.Thesupervisionregulationbasedonsub-projectcanbedividedintofiveparts,namelyprofile,basis,process,mainpoints,checklistsdirectory,whichcanensureitsoperability,butalsoconvenientformanagementsupervisionsidetocheckconstructionpartyandimproveworkefficiency.
关键词:监理细则;模块化;检查
Keywords:supervisionrules;modular;check
中图分类号:TE31文献标识码:A文章编号:1006-4311(2011)12-0291-01
1监理实施细则的现状
根据《建设工程监理规范GB50319-2000》的规定,监理实施细则是根据监理规划,由专业监理工程师编写,并经总监理工程师批准,针对工程项目中某一专业或某一方面监理工作的操作性文件。其编制程序与依据应符合下列规定:①监理实施细则应在相应工程施工开始前编制完成,并必须经总监理工程师批准;②监理实施细则应由专业监理工程师编制;③编制监理实施细则的依据:a.已批准的监理规划;b.与专业工程相关的标准,设计文件和技术资料;c.施工组织设计。④监理实施细则应包括下列主要内容:a.专业工程的特点;b.监理工作的流程;c.监理工作的控制要点及目标值;d.监理工作的方法及措施。
经笔者调查,实际编制的监理细则多数存在如下几个方面的问题:①对专业工程的特点描述不足或漏项;②监理工作流程模糊不清,有很多细则误把施工流程当作监理工作流程;③监理工作控制要点、方法、措施主要抄规范,没有针对性;④没有对目标的描述;⑤监理细则覆盖面不足,管理失控;⑥管理者不能有效地检查监理工作是否到位。
2模块化监理实施细则的组织结构设计
2.1编制哪些监理细则?工程图纸下发后,要进行单位、分部、分项工程划分,这是建设方、监理方、施工方对项目管理控制的基础。建设项目具有高度复杂性,监理实施细则作为指导监理工作的操作性文件,如果按照专业编制,内容必然很多,这样的细则比较冗长,会丧失针对性,且不利于经验的积累。
项目建设施工阶段的过程可以这样描述:前期准备(技术文件的编制、人员机具计划、生产技术准备等)―材料进场和检验―施工和验收。这是一个“人、机、料、法、环”在时间和空间上纵横交错的复杂管理过程。必须从差异性中寻找共同点,从而达到简化流程、优化资源、提高管理效率的目的,而寻找共同点的基础工作就是对管理对象进行拆分,将宏观管理目标尽可能分解到可以“看得见、摸得着的程度”,然后逐一编制操作文件。
2.2监理细则的内容应包括哪些方面?无论是材料检验还是分项工程的监理实施细则,均可以按照表1模式编制。
3监理实施细则模块化的实践应用总结
按照上面的思路,在后四厂及让库搬迁工程中,监理实施细则模块化管理进行了初步应用。
后四厂及让库搬迁工程以工业厂房为主,房号多为混凝土独立基础,主体为混凝土排架结构或轻钢排架结构,附属用房为混凝土框架结构,各单位工程相似度较高,适合推行模块化管理。
根据工程情况,我们编制了监理细则目录,包括测量放线、材料检验、分项工程三大类103项,因专业划分很细,编制工作量较大,难以同时完成,因此,以建筑测量放线、钢筋进场检验、独立基础混凝土浇筑为主进行了试点。
同时,监理实施细则模块化管理在如下几个方面需要改进和注意:①现场培训必须到位。由于这样的监理细则有较强的针对性,但现场施工过程中必然会有很多不确定性,对于经验不够丰富的监理人员,遇到稍微复杂的问题,往往不能及时判断风险,因此,对于规范条文的理解、图集解释等方面要加强培训,防止误判。②有些方面可以继续优化。以混凝土浇筑工程为例,对于基础混凝土或主体框架、梁上的混凝土,其浇筑过程控制要点并无太大的差别,因此,在编制监理细则的时候,对于类似的方面可以考虑引述或编制共用文件,例如,我们编制了混凝土浇筑质量控制检查表,只要经过简单的培训,一个对工程项目具有一般经验的人就可以完成混凝土浇筑旁站监理工作。③监理实施细则的编制必须由经验丰富的监理人员编制,并认真审核。由于模块化管理的基础是对建设过程的深度分解,为了提高管理效率,编制过程中除考虑针对性外,还要考虑到整理性和可操作性,要把握好两者之间的“度”,这样的难题必须由经验丰富的监理人员完成。此外,实施过程中,必然出现不适用的情况,要做到及时改进。④监理实施细则的内容切忌抄规范。以建筑工程为例,黑龙江省地方标准已经很全面了,因此,对于某个分项工程,除非特别重要的地方可以按照规范的阐述在细则中强调一下外,建议对一般性的描述可以少些,而工程本身的专用性描述要重点表述。
出差管理细则篇5
关键词中职检验专业;白细胞计数实验;误差
1引言
中职学校检验专业学生在进行白细胞计数实验中,容易出现实验器材使用不当、实验操作不规范或对实验理论知识不理解而导致实验结果偏差甚至实验过程受阻等;另外,即使一位技术熟练者,使用同一仪器在对同一标本进行连续多次操作,检测结果也常有一定差异。本文提出白细胞计数实验中容易出现的一些问题即技术误差、固有误差以及仪器误差等进行分析探讨且给出相应的解决方法,以尽力避免学生在实验过程中出现的错误操作或无效操作,提高学生操作效率及能力,达到更好的教学效果。
2技术误差
由于操作不正确或仪器不精确造成的误差为技术误差。这类误差通过主观努力可以避免或降到最低程度[1]。采血部位不同结果产生偏差世界卫生组织(WHO)推荐采血部位以左手无名指或中指指尖的内侧为宜。在我国有些地方仍采用耳垂取血,耳垂部位痛感较轻且不易感染,但其血循环较差,受温度变化影响较大,所以一般情况下采用手指部位取血。在学生实验操作时,笔者将30名学生同时采指血和耳垂血,分别进行采血取样进行对照。计数结果是耳垂血白细胞数高于手指血白细胞数的为28例,约占93.3%,平均数值增高1.9×109/L。白细胞数目的多少可能与所在采血部位的血管深浅、粗细、血流速度、血液粘滞度等多种因素有关。耳垂白细胞计数偏高的主要原因可能是耳垂体积小散热快,所处环境温度低,血流慢,血液粘滞度大,白细胞易于沉积。手指则不然,手指活动量大、体积大,温度相对高,血流快,血液粘滞度小,白细胞不易沉积,所以这些可能是手指血白细胞计数偏低的主要原因[2]。计数板不清洁干燥1)计数板的清洁方法。血细胞计数板使用后,取下盖玻片,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗后自行晾干或用吹风机吹干,也可用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。另外,计数板冲洗后,还要通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复清洗直到干净为止,干燥后方可放入盒内保存或使用。2)计数板上残存水滴,会使充液不均,还会造成混合液浓度降低[3]。解决方法:将计数板置于清洁环境,自然干燥或在空气中快速挥动,如急用也可轻轻甩掉计数板上水滴后再用滤纸片将残存水分吸干。3)计数板上残留纤维等杂质影响镜下观察清晰度。解决方法:用流动的清水洗净计数板后再进行上述具体操作。微量吸管使用不当本实验采用一种改进的微量吸管,属于医疗器械技术领域。它由气囊和与之管通的吸管一体构成,气囊与吸管管通一端的底部具有孔,吸管上标有刻度,故可在采取样液时利用指压启闭其孔实现准确性,该吸管具有造价低、精确度高、操作简便灵活的特点,又具有可作为一次性产品使用,能够避免交叉感染等的优点。1)微量吸管折断。解决方法:微量吸管细长易断,在将其插入橡胶头内时,应左手持橡胶头(注意气囊孔的控制),右手必须持住靠近微量吸管上端的部分轻轻操作,才能有效防止其折断。2)微量吸管取样混有气泡。解决方法:取样时,需将微量吸管末端完全浸入血样末端,轻轻抽吸,才不会混入空气。3)血样进入橡胶头。解决方法:取样前应先捏紧橡胶头,封闭气孔,取样时将橡胶头慢慢地、一点一点地松开,如果松开速度过快或力度过大,就会发生上述现象[4]。取样操作不规范以用一次性定量(20μl)微量吸管取末梢血为例,正确操作是:轻轻吸取末梢血到微量吸管第二个刻度线后再多取一点儿,此时右手捏稳橡胶头不动,左手持干棉球置于微量吸管管尖部位,右手轻捏橡胶头挤出管内多余血样至刚好到吸管第二个刻度线为止,此时再用左手的棉球将管尖外多余血液擦掉。上述每一步骤缺一不可。充液不当1)充液量过少造成充液缺损,过多则造成盖玻片悬浮,细胞飘忽不定。2)充液时玻棒位置不正确,造成充液缺损或有气泡。正确操作是:用玻棒蘸取适量混悬液后应轻轻接触盖玻片一角,让液体自动进入计数池并刚好充满后立即移走玻棒。3)充液时间延迟。混悬液完成后应立即充液观察计数,有实验证明如果混悬液放置超过1.5分钟以上在进行充液计数操作,会使计数结果偏低[5]。白细胞在刚刚混匀的液体中均匀分布,而静置超过1.5分钟后白细胞会逐渐下沉,造成混悬液密度不均,在吸取上层液体充液进行计数时会产生偏差[5]。低倍镜下看不到计数池1)了解计数板的构造。血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4个槽构成3个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两个计数区,每个计数区上面各刻有一方格网,每个方格网共分9个大方格,4个角的大方格作为白细胞计数用,每个大方格被单线划分成16个中方格;最中央大方格被双线划分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格,供计数密度较大的红细胞计数时使用。每个计数区由400个小方格组成,计数区边长为1mm,则计数区的面积为lmm2,每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。2)计数板放置位置不正确。计数板有上下两个相同的计数池,应将要观察的、充好液的一侧置于视野中央。3)光线过强。计数板放置好后,调整好焦距,如仍看不到计数池上的画线,可能是光线过强的缘故,调整显微镜光圈或遮光镜至视野较暗,再调整细准焦螺旋至视野清晰即可看到计数池上的画线[6]。辨别不出计数池4个角大方格的位置,解决方法如下。1)先找到计数池内最中央的大方格,特点是横线与竖线均为双线划分的含有25个中方格的大方格,也是线条最密集的大方格就是计数池内最中央的大方格。2)以最中央大方格为标的,分别沿上、下、左、右方向移动计数板,找到外侧两边为单线、内侧两边为双线的含16个中方格的大方格即分别为四个角上的大方格。显微镜下将杂质误认为白细胞1)粉尘颗粒。粉尘颗粒不具备细胞的基本形态,低倍镜下白细胞呈圆形,细胞内有深色的核,上下微调细准焦螺旋白细胞具有折光性。2)气泡。气泡亦不具备细胞的基本形态,微调细准焦螺旋时镜下显现为无细胞结构的空圈。漏数或重复计数1)每一个角上的大方格都被划分为16个中方格,计数时应以中方格为依据,按一定方向和顺序计数,如从上到下、从左到右的顺序。2)对压线的白细胞应采取数上不数下、数左不数右的原则。
3固有误差
由于因每次白细胞分布不可能完全相同而造成的偏差叫固有误差[1]。计数池内细胞分布不均白细胞总数在正常参考范围内时,若每个大方格的白细胞数值相差8个以上视为细胞分布严重不均,可能是混合液密度不均或充液不当,需轻轻摇匀混合液重新充液计数。根据统计学研究白细胞在技术池内的分布符合Poison分布。其变异系数CV=1/m½,m代表计数池重复计数的白细胞均数。通过上式可以得出m越大,CV越小,所以计数范围越大,计数细胞越多,计数域误差越小。常规考核标准学生计数完毕后,通常要用常规计算标准公式来评判实验结果是否达标,否则要重新采血充液计数。即:RCS=(4个大方格所数白细胞数最大值-最小值)/4个大方格所数白细胞平均数评价标准:白细胞≤4×109/L时,RCS<0.3白细胞=(4.1~14.9)×109/L时,RCS<0.2白细胞≥15×109/L时,RCS<0.15超过上述标准为不合格。
4仪器误差
计数板的鉴定要求计数板的台面光滑、透明,画线清晰,计数池画线面积准确,必要时采用严格校正的目镜测微计测量计数池的边长与底面积,用微米千分尺测量计数池的深度。美国国家标准局(NBS)规定每个大方格边长的误差应小于1%,即1±0.01mm,深度误差应小于2%,即0.1±0.002mm。若超过上述标准,应弃之不用。盖玻片的标准盖玻片应平整、光滑、无裂痕,厚薄均匀一致,可使用卡尺多点测量(至少在9个点),不均匀度在0.002mm之内,必要时采用平面平行仪进行测量与评价,要求呈现密集平行的直线干涉条纹。最简单的评价方法是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上,若能吸附一定的时间不脱落,落下时呈弧线形旋转,表示盖片平整、厚薄均匀。同时,合格的盖片放置在计数池表面后,与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹。精选出的盖片与其他盖片紧密重合后,在掠射光线下观察,如见到完整平行的彩虹条纹表示另一枚盖片质量也达标。如果盖玻片不达标势必会影响实验结果的准确性。
5其他情况
白细胞总数过低计数完成后,白细胞总数过低者(<3×109/L),可扩大计数区域或重新加倍取血计数。白细胞总数过高对于白细胞总数过高者(>15×109/L),可增加稀释倍数重新计数,如若是外周血中有核红细胞过多,必须再进行白细胞分类计数,然后用校正公式予以校正除去。校正公式[1]:白细胞总数=校正前白细胞数×[100/(100+100个白细胞中的有核红细胞数)]以上所述大致涵盖了学生在白细胞计数实验中容易出现的问题,若能有效克服,必定会大大增强实验结果的可靠性。另外,熟能生巧,该项实验初次完成后,建议再利用一些课时进行白细胞计数实验的技能考试,强化规范操作,为日后进行红细胞计数及血小板计数等实验打下良好基础。
参考文献
[1]安艳,赵平.临床检验[M].2版.北京:人民卫生出版社,2008.
[2]张燕凌.关于“白细胞计数误差大”问题的探讨[J].洛阳理工学院学报:自然科学版,1994(4):64-66.
[3]王霞.血常规检验的常见误差原因分析[J].健康导报:医学版,2014,1(5):67.
[4]潘顺华.血常规检验的常见错误原因分析[J].医药前沿,2016,6(24):374-375.
[5]郭汉英.关于白细胞计数测定时间的探讨[J].河南医药信息,1995(2):5.

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